meetcai Flex PCR 워크 스테이션의 작업 원리는 분자 생물학 기술인 PCR (중합 효소 연쇄 반응)의 핵심 원리에 깊이 뿌리 박혀 있으며 자동화 실험실 장비 연구 및 개발 분야에서 meetcai의 최첨단 기술과 혁신적인 성과를 영리하게 통합합니다. 고도로 통합 된 자동화 시스템을 통해 워크 스테이션은 본질적으로 DNA의 복제 프로세스를 정확하게 시뮬레이션 할뿐만 아니라 실험의 정확성, 반복성 및 효율성을 크게 향상시킵니다.
PCR 반응 조건은 온도, 시간 및 사이클 시간을 포함한다. 이러한 조건의 선택 및 최적화는 PCR 반응의 성공에 중요하다. 1. 온도 변성 온도 : 일반적으로 90-95 ℃로, 템플릿 DNA를 단일 가닥으로 완전히 변성하는 데 사용됩니다. 어닐링 온도 : 프라이머의 TM 값, 일반적으로 40-60 ° C에 기초하여 결정되며, 이는 프라이머를 주형 DNA에 결합하는 데 사용됩니다. 연장 온도 : 일반적으로 70-75 ℃에서, DNA 가닥 연장은 Taq DNA 폴리머 라제의 작용하에 수행된다. 2. 시간 변성 시간 : 일반적으로 1 분과 같은 짧은 주형 DNA를 완전히 변성하기에 충분합니다. 어닐링 시간 : 일반적으로 30-60 초, 프라이머를 주형 DNA에 완전히 결합하기에 충분합니다. 연장 시간 : 증폭 될 단편의 길이에 따라 일반적으로 1-15 분. 3. 사이클 수는 일반적으로 25-35 일수록 증폭 생성물이 클수록 비특이적 인 제품의 생산을 증가시킬 수 있습니다.
2. 준비 단계 1. 설계 프라이머 : 프라이머가 주형 DNA에 효율적으로 결합하고 증폭을위한 DNA 폴리머 라제에 효율적으로 결합 할 수 있도록 표적 DNA 서열에 따른 설계 특정 프라이머. 2. 템플릿 DNA 준비 : 템플릿 DNA의 순도와 농도가 PCR 반응의 요구 사항을 충족하도록하십시오. 주형 DNA는 생물학적 샘플로부터 추출 될 수 있거나 다른 공급원으로부터 DNA 조각 일 수있다. 3. 반응 시스템 준비 : PCR 반응의 요구 사항에 따라, 혼합 주형 DNA, 프라이머, DNTP (Deoxynucleoside Triphosphate), 완충액, MGCL2 (필요한 경우), DNA 폴리머 라제 등을 특정 비례하여 PCR 반응 시스템을 형성합니다. 이 단계는 외래 DNA의 간섭을 방지하기 위해 핵산이없는 환경에서 수행되어야합니다. 4. 샘플로드 : 준비된 PCR 반응 시스템을 meetcai Flex PCR 워크 스테이션의 지정된 위치, 일반적으로 PCR 보드 또는 PCR 튜브에로드하십시오. 반응 시스템 부피 및 조성이 각 웰 또는 튜브에서 일관성이 있는지 확인하십시오.
3. 프로그램 설정 1. 장치 연결 : meetcai Flex PCR 워크 스테이션을 컴퓨터 또는 기타 제어 장치에 연결하여 장치가 정상적으로 통신 할 수 있는지 확인하십시오. 2. 소프트웨어 시작 : meetcai에서 제공 한 제어 소프트웨어 또는 인터페이스를 열고 PCR 반응 프로그램을 설정할 준비를합니다. 3. 새로운 PCR 프로그램 만들기 : 소프트웨어에서 새로운 PCR 프로그램을 만들고 변성, 어닐링 및 확장을 포함한 온도, 시간 및주기 시간과 같은 매개 변수를 설정하십시오. 이들 파라미터는 표적 DNA 서열의 특성 및 사용 된 프라이머를 기반으로 설정해야한다. meetcai Flex PCR 워크 스테이션은 일반적으로 실험 요구 사항에 맞게 사용자 정의 할 수있는 유연한 프로그래밍 기능을 지원합니다. 4. 프로그램 저장 및 업로드 : SET PCR 프로그램을 meetcai Flex PCR 워크 스테이션에 저장하고 업로드하십시오. 프로그램이 올바른지 확인한 후 PCR 반응을 수행 할 준비를하십시오.
4. PCR 반응을 수행합니다. 1. 반응 시작 : 소프트웨어 인터페이스에서 "시작"또는 유사한 버튼을 클릭하여 PCR 반응을 시작하십시오. meetcai Flex PCR 워크 스테이션은 사전 설정 절차에 따라 온도 제어 및 사이클 작업을 자동으로 수행합니다. 2. 반응 모니터링 : 반응 과정에서 반응 상태와 진행 상황을 소프트웨어 인터페이스를 통해 실시간으로 모니터링 할 수 있습니다. meetcai Flex PCR 워크 스테이션에는 일반적으로 온도 곡선 및 사이클과 같은 주요 정보를 실시간으로 표시 할 수있는 강력한 모니터링 기능이 있습니다. 3. 종말 반응 : PCR 반응이 사전 설정된 사이클 수에 도달하면 meetcai Flex PCR 워크 스테이션은 자동으로 반응을 중지합니다. 이때, 후속 분석을 위해 PCR 플레이트 또는 PCR 튜브를 제거 할 수 있습니다.
5. 후속 처리 1. PCR 생성물의 분석 : 아가 로스 겔 전기 영동 또는 기타 적절한 방법에 의한 PCR 생성물의 특이성 및 수율 분석. 증폭 된 제품이 예상 크기와 수량을 충족하는지 확인하십시오. 2. 데이터 기록 및 콜레이션 : PCR 반응의 결과와 데이터를 기록하고 필요한 협업 및 분석을 수행하십시오. 이 데이터는 후속 실험 검증 또는 과학 연구에 사용될 수 있습니다. 3. 청소 및 유지 보수 : PCR 반응을 완료 한 후 meetcai Flex PCR 워크 스테이션 및 관련 장비를 적시에 청소하여 오염 및 손상을 방지하십시오. 동시에 장비의 성능과 상태를 정기적으로 확인하여 장비가 오랫동안 안정적으로 작동 할 수 있는지 확인하십시오.
위의 단계는 일반적인 PCR 반응 원리 및 meetcai Flex PCR 워크 스테이션의 기능적 특성을 기반으로하는 일반 가이드입니다. 특정 작업은 meetcai Flex PCR 워크 스테이션의 사용자 설명서를 참조하거나 meetcai 기술 지원 팀에 문의하여 정확한 지침을 참조하십시오.